免费看操片Iav黄色网I国精无码欧精品亚洲一区蜜桃I三级黄色免费I欧美大片免费播放器I日本a级黄绝片a一级啪啪I91成人一区二区三区Ix7x7x7成人免费视频I欧美一级一区二区三区I色噜噜狠狠色综合久I国产午夜小视频I亚洲一区二区在线观看视频I亚洲乱色熟女一区二区三区I99视频I久久1区I日本一区二区影院I国产精品久久久久久精I亚洲区精品I777亚洲I黄色小视频链接

18918841678
ARTICLE

技術文章

當前位置:首頁技術文章細胞培養基大盤點

細胞培養基大盤點

更新時間:2022-01-25點擊次數:5680

 

細胞培養基的概念
 

01

細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,并提供細胞營養和促進細胞生長增殖的基礎物質。細胞培養基是細胞培養的基礎,它為動物細胞的健康快速成長提供營養物質。所以,只要用到細胞進行生物技術產品的生產制造,就勢必少不了細胞培養基。培養液或培養基,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養基,而將粉劑配成液體后,多稱為培養液。培養液中常需補加血清、抗生素等成分。                             

 

細胞培養基的分類
 
02

培養基主要有:天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。

天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基,直接取自于動物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高,但成分復雜,差異大、不穩定,來源也受限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養基,富含氨基酸。血清是天然培養基中有效的培養添加物,但其組成成分復雜,其中一些成分與功能不明確。血清的來源有胎牛血清、小?;虺膳Q?、馬血清、雞血清、羊血清及人血清,廣泛應用的為胎牛血清和小牛血清。

合成細胞培養基是用化學成分明確的試劑配制的培養基,組分穩定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。1950年,Morgan成功研制出具有確定化學成分的細胞培養液,即M199培養基,可用于培養多種種屬來源的細胞。1951年,Harry Eagle研發了動物細胞體外生長的人工合成培養基,即Eagle's minimum essential medium基(MEM培養基),是目前使用廣泛的合成細胞培養基之一。合成細胞培養基發展至今已有幾十種,除了沿用半個世紀的基礎合成細胞培養基之外,近年來還出現了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基。

在細胞培養中,需要根據細胞種類和培養條件的不同選擇合適的合成細胞培養基。目前,在動物細胞培養中常用的基礎細胞培養基有BME、MEM、DMEM、RPMI-1640、Ham F12、M199 等。由于天然培養基的一些營養成分不能被合成細胞培養基*代替,因此一般需在合成細胞培養基中添加5%~10%的胎牛血清。胎牛血清的加入對細胞培養非常有效,但胎牛血清的成分復雜,這對培養產物的分離、純化和檢測會帶來一定的不便,為減少胎牛血清的影響,開發了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基,可以將胎牛血清的使用量降低到1~3%。

無血清細胞培養基(serum free medium, SFM)是指在使用中無需添加血清的細胞培養基,且其組成成分不含有任何動物組分。按照其組分分類,還可以分為無動物組分無血清細胞培養基和化學限定無血清細胞培養基,前者組分中可能含有某些植物來源成分,而后者*由化學成分明確的組分組成。

其中,無動物組分無血清細胞培養基是目前在生物制藥行業中應用廣泛的,它提高了細胞培養的質量,避免了使用血清帶來的麻煩。目前,已有多種無血清培養基上市,如雜交瘤細胞無血清培養基、CHO細胞無血清培養基、Vero細胞無血清培養基和NS0 細胞無血清培養基等。無血清培養基通常添加生長附加成分,如激素與生長因子、低分子營養成分和轉鐵蛋白等促細胞生長的附加成分,一般包括胰島素、孕酮、sodium selenate、腐胺、轉鐵蛋白等。

   

 

細胞培養基的基本成分
 
03

細胞培養基的主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。人工合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。

氨基酸:組成蛋白質的基本單位。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過轉氨作用由其他物質轉化而來。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,因為谷氨酰胺是作為能源及碳源物質同時被細胞利用,是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,所以各種培養液中都含有較多的谷氨酰胺。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構體,D型氨基酸不能被利用。

維生素:維持細胞生長的一種生物活性物質,對細胞代謝有重大作用。它們在細胞中大多形成酶的輔基或輔酶,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。維生素分為水溶和脂溶兩大類,培養液中直接采用ATP和CoA。

葡萄糖:大部分培養基都以葡萄糖作為能量來源之一。

無機鹽:維持培養基滲透壓平衡,參與細胞的代謝活動。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+ 等。Na+是細胞外液中最主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于激活某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將組織內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時,為了減少細胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控有重要作用。

其他成分:表皮生長因子、胰島素、多肽、核苷、嘌呤等??蓭椭毎目寺』囵B及維持某些特殊細胞系的生長。

  

 

血清的應用
 
04

血清:用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因主要是來源充足、制備技術成熟、經過長期的實際應用人們對其有比較深入的理解。

牛血清可分為胎牛血清、新牛血清、小牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛。新牛血清取自出生24小時之內的新生牛。小牛血清取自出生10~30 天的小牛。其中,胎牛血清品質好是因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清中含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。

血清的主要作用:1) 提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2) 提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(Cortisol、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3) 提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4) 提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷,對培養中的細胞起到某些保護作用。

血清的優點和缺點:血清是非常復雜的混合物,成分多樣,含有各種生理平衡的分子量差別很大的生物分子,有的對細胞生長有促進作用,如含有攜帶激素、礦物質、微量元素和脂類物質的轉運蛋白等。血清能夠提供細胞貼壁因子和擴散因子。血清中含有起穩定作用和解毒的因子,能夠維持培養基的pH 值并抑制蛋白酶直接或間接的酶解。

但是,血清的加入也帶來了很多問題:1) 血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難。2) 血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制。3) 不能排除血清中含有易變物質。4) 對大多數細胞,在體內狀態,血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞)。5) 血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。6) 取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響。7) 血清的使用使得實驗和生產的標準化困難,其中的蛋白質使得某些轉基因蛋白生物藥品生產中分離純化工作很難完成。8) 大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成生產成本的主要部分之一。9) 為了使與傳染源相關的風險減少到minimum,存在多個國家間限制進出口生物材料的國際法規。

 

 

細胞培養基產品舉例
 
05

貨號 產品名稱 規格
Gibco進口部分
11875093 RPMI 1640 Medium 500ml
11965092 DMEM,高糖 500ml
11995065 DMEM,高糖,含丙酮酸鹽 500ml
11330032 DMEM/F-12,HEPES 500ml
11090081 MEM,不含谷氨酰胺 500ml
16600082 McCoy's 5A (改良)培養基 500ml
14200075 DPBS (10X),無鈣、無鎂 500ml
31985070 Opti-MEM™ I 減血清培養基 500ml
15140122 青霉素-鏈霉素(10,000 U/mL) 100 ml
25200072 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 500ml
25200056 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 100 ml
12561049 MEM α,無核苷 1000ml
17504044 B-27™ Supplement (50X), serum free 10ml
17504001 B-27™ Supplement (50X), serum free 100 mL
17502048 N-2 添加劑 (100X) 5ml
17502001 N-2 添加劑 (100X) 50ml
17101015 II 型膠原酶,粉末 1g
17104019 IV 型膠原酶,粉末 1g
12440053 IMDM 500ml
10270106 南美血清 500ml
10099141 澳洲胎牛血清 500ml
10099141C Fetal Bovine Serum, 澳洲胎牛血清 500ml
21127022 Ham's F-12K (Kaighn's) 培養基 500ml
14190144 DPBS,無鈣、無鎂 500ml
11095080 MEM 500ml
10010023 PBS,pH 7.4 500ml
Gibco國產部分
C11995500BT DMEM basic (1X) 500ml
C11875500BT RPMI Medium 1640 basic (1X) 500ml
C10010500BT PBS pH 7.4 basic (1X) 500ml
C12571500BT MEM Alpha basic (1X) 500ml
C11330500BT DMEM/F-12,HEPES 500ml
C11885500BT DMEM,低糖,含丙酮酸鹽 500ml
C11965500BT DMEM,高糖 500ml
C11095500BT MEM 500ml
C11765500BT Ham's F-12 Nutrient Mix 500ml
C11150500BT 199 培養基,Earle's 平衡鹽 500ml
附帶:Corning耗材(部分
3516 6孔細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
3513 12孔細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
3524
24孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3548 48孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3599 96孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3799 96孔U底細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
430165 35mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430166 60mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430167 100mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430599 150mm細胞培養皿 12包/箱,5個/包
430168 25cm正方斜口細胞培養瓶 25包/箱,20個/包
430639 25cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 10包/箱,20個/包
430720 75cm正方黃蓋斜口細胞培養瓶 20包/箱,5個/包
430641 75cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 20包/箱,5個/包
430823 150cm正方斜口細胞培養瓶 10包/箱,5個/包
430825 150cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 10包/箱,5個/包

   

上海昆盟生物科技有限公司
Coweldgen Scientific
返回列表
  • 聯系地址

    上海市徐匯區銀都路466號聚科生物園1號樓303室
  • 聯系郵箱

    kunmsales006@163.com
  • 聯系電話

    021-51216810
  • 聯系QQ

    550138389

版權所有©2026 上海昆盟生物科技有限公司   備案號:滬ICP備19032849號-2

技術支持:化工儀器網  管理登陸  sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 亚洲国产精品毛片| 五月婷婷激情综合网| 日韩在线一区二区三区| 超碰在线国产| 欧美黄色www| 小伸进喷水网站| www.日韩精品| www.jizzjizz.com| 老司机精品在线| 日韩精品无码一区二区三区| 日韩av在线看免费观看| www夜夜| 欧美精彩视频| 在线免费看黄色| 欧美精品在线观看| ady狠狠网站| 深爱激情站| 国产一区在线播放| 欧美性受| 88av网站| 日韩一级成人| 久久99日| 精品人妻一区二区免费| 亚洲天堂激情| 免费播放片大片| 人妻91麻豆一区二区三区| 激情综合视频| 日韩av福利| 亚洲av毛片成人精品| 97伦伦午夜电影理伦片| 亚洲欧美激情在线| 777奇米四色| 伊人网站| 久久久久国产精品视频| 99视频99| 日本少妇久久| 久久经典| 日韩av第一页| 超碰中文字幕| 手机看片日韩日韩| 山村大伦淫第1部分阅读小说| 91毛片在线| 91av成人| 亚洲天堂日韩av| 国产高中女学生第一次| 国产乱国产| 国产电影久久久| 伊人久久精品| 日b视频网站| 另类av在线| 国产a大片| 国产乱妇无乱码大黄aa片| 波多野结衣在线视频网站| 日本无遮羞调教打屁股网站| 在线观看你懂的视频| 午夜免费视频网站| 看看黄色片| 国产盗摄视频在线观看| 日批视频国产| 66精品| 91爱爱爱| 先锋av网| 少妇精品视频一区二区| 青娱乐极品盛宴av| 91九色蝌蚪| 五月天综合网| 天天做天天射| www中文字幕| 日韩精品―中文字幕| 亚洲骚图| 色视频导航| 天天拍天天操| 久久久久久久久蜜桃| 华人永久免费| 成人久久| 久久久艹| 看黄免费网站| 韩日视频| 亚洲第一免费网站| 麻豆av电影网| 又爽又黄又无遮挡| 男人插女人网站| 射进来av影视网| 久久久久久久久97| 国产精品性生活| 久久精品a| 亚洲三区电影| 精品一区二区三区四区外站| 国产男女在线观看| 黄色片aa| 亚洲天堂777 | 欧美视频网址| 制服丝袜一区二区三区| 白浆一区| 海角社区在线| 日韩日韩日韩日韩日韩| 先锋影音av资源站| 成人在线影片| 国产美女精品人人做人人爽| 中文字幕五码| 91看片淫黄大片| 中文字幕综合网| 色综合福利| 日本天堂在线视频| 亚洲视频一区二区| 青青在线免费观看| 日本福利在线| 污黄视频在线观看| 国产一区二区播放| 自拍视频第一页| 亚洲成人1区| 亚洲综合无码一区二区| 99999av| 欧美精品做受xxx性少妇| 茄子视频色| 亚洲乱码少妇| 91大片免费看| 无码人妻精品一区二区三区不卡| 99热国内精品| 伊人开心综合网| 天天搞夜夜爽| 岛国一区| 国产视频首页| 国产精品入口夜色视频大尺度| freexxx69性欧美护士| 日韩免费淫片| 91久久亚洲| 日韩在线免费av| 婷婷久久精品| 日韩爽爽影院| 亚洲三级黄| 午夜精品免费| 五月婷婷激情| 中国女人内谢69xxxx| 国产成人精品123区免费视频| 内裤摩擦1v1h| 亚洲av日韩aⅴ无码色老头| av色先锋| av手机天堂网| 天堂av电影| 亚洲狼人社区| 国产一区在线观看视频| 韩国三级与黑人| 久久影视院线| 亚洲成熟少妇视频在线观看| 激情五月婷婷| 综合人人| 亚洲性精品| 欧美在线视频网站| 日本中文字幕久久| 国产成人精品视频在线观看| 国产欧美一级| 成人午夜电影在线| 午夜久| 免费视频a| 亚洲人妻一区二区| 人人干人| 亚洲精品在线免费看| www天天操| 好吊妞视频在线| 欧美乱妇高清无乱码| 欧美精品videos极品| 天天舔天天干| 欧美顶级黄色大片免费| 韩日视频一区| 黄色小视频在线播放| 亚洲偷自| 精品人妻伦九区久久aaa片| 欧美激情精品久久| 日韩美av| 欧美伊人| 粉嫩av在线| 欧美视频在线观看一区| 最新av中文字幕| 日韩理论片在线观看| 国产一区二区精品丝袜| 97超碰碰碰| 男人天堂免费视频| 午夜影院视频| 日韩av成人在线| 色91视频| 久久视频一区| 亚洲美女性生活| 激情综合激情| 无码精品人妻一区二区三区漫画 | 精品国产乱码久久久久久1区二区| 精品乱码一区二区三四区 | 亚洲毛片一区二区| 中文天堂在线播放| asian日本肉体pics| jizz国产免费| 亚洲国产成人一区二区| 午夜精品视频在线观看| 国模吧一区二区| jlzzzjlzzz国产免费观看| 人人看人人澡| 激情成人综合网| 国产精品1区| www色视频| www视频在线免费观看| 免费日韩一区| 天天色天天射综合网| 午夜一级大片| 友田真希av在线| 色婷婷综合视频| 久久久wwww| 国产又粗又大又爽视频| 黄色免费网| sese在线视频| 中文字幕在线观看一区二区| 91tv国产成人福利| 日本成人激情| 天天干夜夜骑| 日本黄色高清视频| 亚洲国产无码精品| 韩国色网| a天堂资源在线观看| 日本午夜影院| 精品国产鲁一鲁一区二区三区| 成人免费看黄色片| 老子影院午夜伦不卡大全| 久久在线| 精品少妇一区二区三区免费看| 熟妇无码乱子成人精品| 大黑人交交护士xxxxhd| 中文字幕91| 久草麻豆| 男女午夜激情| 国产黄色一区二区| 日韩av网站大全| 福利所导航| 一级全黄裸体片| 亚洲美女黄色片| sm一区二区三区| 涩涩爱影院| 97久久精品视频| 杰克影院在线观看免费播放| 久久这里只有精品6| 簧片av| 亚洲女优网| 91国内视频| 女女h百合无遮涩涩漫画软件| 国产成人小视频在线观看| 入禽太深免费视频| 成年人在线视频观看| 麻豆出品必属精品| 久久一区中文字幕| 精品一区久久久| 久久重口味| 四虎影视国产精品| 亚洲综合小说电影qvod| av在线免费网站| 一级a性色生活片久久无| 日韩一区二区三区精品视频| 国产浮力第一页| 99久久精品费精品蜜臀| 99成人| 一级性视频| 国产精华一区二区三区| caoporn超碰97| 久久伊人草| 精品国产999| 日本高清www| 操狠狠| 97操操| 91色噜噜| 尤物av在线| 在线看污视频网站| 天堂va在线视频| 日本精品成人| 女优一区二区三区| 成人在线直播| 成人小视频在线| 日韩黄色a级片| 国产a级黄色| 芒果视频污污| 福利社午夜| 日本泡妞视频| 免费污片网站| 性色在线视频| 伊人啪啪| 久国产| 欧美激情综合在线| 极品美女高潮| 久久影| 久久狠狠爱| 欧美在线性| 91在线精品秘密一区二区| 五月婷婷狠狠爱| 成人综合网站| 欧美色图小说| 好吊色综合| 在线中文字幕av| 欧美成人亚洲| 九九九色| 最近中文字幕| 激情另类小说| 日本h在线观看| hs网站在线观看| 亚洲AV无码精品一区二区三区| 97久久久| 国产女人18| av网站在线免费| 亚洲欧美激情图片| 瑟瑟av| 精品国产91久久久久久| 91精品人妻一区二区三区蜜桃2| 麻豆系列在线观看| 精品国产乱码久久久久久影片 | 91豆花精品一区| 搡老岳熟女国产熟妇| 日韩精品一区二| 日本电影一区| 欧美mv日韩mv国产| 久久综合99re88久久爱| 日韩精品麻豆| 美日韩黄色片| 国产系列在线观看| av电影久久| 亚洲一区二区三区在线免费| 精品视频免费在线观看| 日本三级播放| 国产精品福利电影| aⅴ黄色| 四虎网站在线播放| 日韩三级电影网址| 男女激情网站免费| 天天射天天爽| 奇米影视首页| 欧美视频综合| 日批视频免费在线观看| 国产视频一区二区在线观看| 噜噜av| 雪花飘电影中文高清| 天天影视综合| 5566在线| 红桃视频国产精品| 校园春色综合| 亚洲高清色综合| 一区二区在线观看免费视频| 日本成人午夜| 久久免费av| 岳两女共夫互换观看视频| 北京富婆泄欲对白| 成人激情综合| 国产在线免费视频| 成人免费小视频| 四虎在线免费观看| 又粗又猛又爽又黄少妇视频网站 | 中字幕一区二区三区乱码| 日韩精品在线一区| 一区在线观看视频| 国产影视一区| 秒拍福利视频| 伊人久久大香线蕉成人综合网| 波多野结衣91| 国模一区二区| 国内一级视频| 中文字幕66| 免费a在线| 精品国产一区在线观看| 窝窝午夜视频| 久久加勒比| 伊人称影院| 偷偷解开女同桌内裤动态图| 久久| av网站在线播放| 激情图片区| 黄色录像a| 成人在线视频在线观看| 成人免费黄色| 久久免费一区| 911精品国产一区二区在线| 国产精品久久久久久久蜜臀| 青青一区二区| 亚洲人人干| 午夜影院私人| 亚洲特黄| 五月天久久久久| 丁香花高清在线观看完整动漫| 毛片天天看| www.色在线观看| 亚洲精品亚洲人成人网| 国产第9页| 视频二区欧美| 亚洲人成小说| 中国的毛片| 久久免费视频播放| 国产毛片久久| 成人爽a毛片一区二区免费| 狠狠干狠狠干| 欧美性狂猛xxxxxbbbbb| 欧美大片黄色| 欧美精品久久久久久久多人混战| 东京干手机福利视频| 欧美不卡影院| 亚洲少妇在线| 久久精品666| 国产传媒专区| 啪啪黄色片| 久久爱一区二区| 99在线小视频| 亚洲国产精品免费| 先锋影音国产精品| 精品久久久久久一区二区里番| 亚洲激情小视频| 欧美一区二区三区观看| 久久久精品91| 亚洲精品7777| 一级裸体视频| 欧洲精品在线视频| 91精品国产综合久久久久久| 国产又粗又黄又爽又硬一区二区| 涩涩网站在线观看| 一道本在线视频| 秋霞视频在线| 日本精品专区| 手机在线观看av| 亚洲中文字幕无码不卡电影| 国产自产一区二区| 国产精品v亚洲精品v日韩精品| 亚洲三级影院| 免费看av大片| 色婷婷av一区二区三区之红樱桃| 天天操天天玩| 超碰人人舔| 欧美性猛交xxxx乱大交退制版| 特淫毛片| 久久无码视频网站| 中文字幕成人在线观看| 婷婷丁香五月中文字幕| 免费人成在线观看| 青草精品在线| 久久精品片| 欧美国产91| 99国产精品99久久久久久粉嫩| 日韩在线观看视频一区二区三区| 日本碰碰| 奇米成人| 日韩欧美二区三区| 成人精品视频在线| 特黄特色免费视频| 森林影视官网在线观看| 91人人草| 好紧好爽再浪一点视频| 天天综合影院| 变态另类丨国产精品| 无码人妻精品一区二区| 激情五月俺也去| 九九热伊人| 免费成人av网址| 波多野结衣亚洲一区二区| 91抖音成人| www.好了av| 免费性情网站| 四库成人免费视频| 乱色视频| 欧美在线免费观看一区二区三区| 91在线免费观看网站| 国精品一区| 精品h视频| 欧洲天堂网| 亚洲视频国产| 欧美在线你懂| 在线视频国产一区| 五月香婷| 黄色成年网站| 久久精品999| 91美女免费看| 欧美色悠悠| 综合色伊人| 国产精品1区2区3区4区| 无毛av| 桃色视频在线| 91精品久| 狠狠亚洲| 新中文字幕| 一级视频免费观看| 亚洲国产福利在线| 欧美黄色录像免费看| 97超碰中文| 亚洲精品乱码久久久久99| 欧美成年网站| 亚洲天堂一| 国产精品日韩一区| 人人人妻人人澡人人爽欧美一区| 日韩男女视频| 国产精品成人va在线观看| 男女视频网址| 色老大视频| av免费久久| 春色av| 欧美一区二区三区免费在线观看| 福利色播| av在线免费观看网址| 午夜视频h| 激情全身裸吻胸| 天天色天天舔| 午夜精品999| 88av视频|